在产品质量属性上,AAV亲和列重复使用和矢量稳定性的影响
Harshal Soni1, Ira Lako2, Matteo Placidi2
1Department of Chemical and Biological Engineering, Center for Biotechnology and Interdisciplinary Studies, Rensselaer Polytechnic Institute, Troy, New York, USA.
Biotechnology and bioengineering
|July 24, 2023
概括
在腺相关病毒 (AAV) 净化过程中对柱子的重复使用会因杂质而影响产品质量. 树脂选择和化pH值显著影响AAV载体聚合和杂质携带在染色学过程中.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 生物加工是一种生物加工.
- 病毒载体制造业 病毒载体制造业
背景情况:
- 腺相关病毒 (AAV) 载体对于基因疗法至关重要.
- 在AAV制造过程中确保高质量的产品是必不可少的.
- 亲和色谱是AAV净化的一个关键步骤.
研究的目的:
- 调查AAV体设计和列重复使用对AAV9矢量质量的影响.
- 为了评估POROS CaptureSelect (PCS) AAVX和AAV9树脂的性能.
- 了解工艺杂质如何影响AAV净化和产品质量.
主要方法:
- 使用sf9昆虫细胞衍生模型AAV9载体,具有不同的病毒蛋白 (VP) 比率.
- 使用PCS AAVX和PCS AAV9亲和树脂进行了色谱实验.
- 在多个列重复使用周期中评估载体化配置文件,聚合物含量和杂质配置文件.
主要成果:
- 纯化的AAV9载体化不依赖VP比率或循环数.
- 澄清溶解酸中的工艺杂质显著改变了化模式,增加了载体聚合.
- 特定于AAV9的列显示了比AAVX列的重复使用周期更高的聚合.
- 载体聚合物含有双链DNA和基因素蛋白,表明由于不完全清洗而导致的携带.
结论:
- 料杂质,树脂类型,溶解pH值和清洁程序极大地影响了AAV亲和系列的可重复使用性和载体产品质量.
- 不完整的清洁在位 (CIP) 有助于宿主细胞杂质的转移.
- 优化净化过程对于一致的AAV载体生产至关重要.
