保存人类血小板样本的优化协议,用于度多酸盐量化.
Tomoyuki Kawase1, Katsuya Suzuki2, Masami Kamimura2
1Division of Oral Bioengineering, Graduate School of Medical and Dental Sciences, Niigata University, Niigata 951-8514, Japan.
Methods and protocols
|July 25, 2023
概括
血小板聚酸盐 (polyP) 的标准化保存对于准确量化至关重要. 包括固定和冷在内的新方案保持多聚的水平长达六周,使大规模研究成为可能.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 血液学 血液学 血液学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 血小板聚酸盐 (polyP) 的量化在血液学研究中至关重要.
- 现有的多聚量化方法,如使用4',6-二胺-2-英二醇 (DAPI),需要标准化样本保存.
- 目前的保存技术缺乏标准化,可能会影响实验结果.
研究的目的:
- 评估和验证血小板聚酸盐 (polyP) 的长期保存方案.
- 建立可靠的方法来维持血小板PolyP水平,以准确量化.
- 在血小板研究中支持高通量分析和大型队列研究.
主要方法:
- 对血小板样本的潜在保存协议的选.
- 使用纯富血小板血 (P-PRP) 和洗净的血小板悬浮液测试选定的方案.
- 使用度测量量和将血小板数量正常化来量化质量PolyP水平.
主要成果:
- 在标准条件下 (控制) 在4°C下7天后,血小板PolyP水平下降了20%.
- 在用ThromboFix固定的样本中,PolyP水平在长达6周内保持稳定,然后在去除固定剂后在-80°C冷.
- 经过验证的协议证明了血小板多P的有效长期保存.
结论:
- 一种涉及固定和随后冷的新型保存协议有效地维持了血小板聚P水平.
- 这些经过验证的方法克服了基于DAPI的量化限制,并使得血小板样本的可靠,长期存储成为可能.
- 已建立的协议促进了对血小板聚酸盐的大规模,高通量研究.
