使用基于RPA-CRISPR/Cas12a的双读输出便携式平台,快速,灵敏和可视地检测Clonorchis sinensis
Taojun Huang1, Lu Li1, Jianhua Li1
1State Key Laboratory for Diagnosis and Treatment of Severe Zoonotic Infectious Diseases, Key Laboratory for Zoonosis Research of the Ministry of Education, Institute of Zoonosis, and College of Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China.
International journal of biological macromolecules
|July 26, 2023
概括
使用RPA-CRISPR/Cas12a的新型便携式检测平台准确识别了导致肝病的寄生虫Clonorchis sinensis. 这种快速测试提供了敏感和特定的结果,用于资源有限的环境.
科学领域:
- 寄生虫学的寄生虫学
- 分子诊断学 分子诊断
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 昆虫Clonorchis sinensis感染导致严重的肝胆道疾病,包括胆管癌.
- 对C. sinensis的有效和可访问的诊断工具对于公共卫生至关重要.
- 目前的检测方法可能缺乏广泛查所需的灵敏度或可移植性.
研究的目的:
- 开发一个快速,灵敏和特定的便携式检测平台,用于Clonorchis sinensis.
- 使用CRISPR/Cas12a系统进行核酸检测,并结合复合酶聚合酶放大 (RPA).
- 用人类便和鱼肉样本验证平台的性能.
主要方法:
- 开发一种与CRISPR/Cas12a测定相结合的复合酶聚合酶放大 (RPA).
- 侧流带和视觉光的整合,用于双重读取检测.
- 新平台与嵌套PCR进行样本分析的比较.
主要成果:
- RPA-CRISPR/Cas12a平台表现出高灵敏度 (1拷贝/μl) 和高特异性.
- 在10%的人类便样本和28%鱼肉样本中检测到C. sinensis.
- 便携式平台的结果显示,与嵌套PCR有很强的一致性.
结论:
- 开发的双读取便携式平台为C. sinensis检测提供了稳定,灵敏和准确的方法.
- 这项技术为偏远和资源有限的地区提供了一种新的护理点检测 (POCT) 解决方案.
- 该平台的低设备要求使其适合广泛的临床应用.
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