在人类内皮细胞中使用CRISPR-Cas9介导的标记与HiBiT探测E-选择素的表达
Lydia Ogrodzinski1,2, Simon Platt1,2, Joelle Goulding1,2
1Division of Physiology, Pharmacology and Neuroscience, School of Life Sciences, University of Nottingham, NG7 2UH Nottingham, UK.
iScience
|July 27, 2023
概括
研究人员开发了一种新方法,使用NanoLuc二进制技术 (NanoBiT) 和CRISPR-Cas9.9实时跟踪E-选择素表达. 这一突破使细胞表面蛋白质变化的敏感监测成为可能,有助于对炎症性疾病的药物发现.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 分子生物学分子生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 在炎症期间,E-选择素对白细胞粘附至关重要.
- 现有的方法缺乏实时监测活细胞中的E-选择素表达.
研究的目的:
- 开发一种用于实时监测内源性E-选择素表达的新方法.
- 使用NanoLuc二进制技术 (NanoBiT) 和CRISPR-Cas9进行敏感检测.
主要方法:
- 使用CRISPR-Cas9基因组编辑,用HiBiT片段标记人类静脉内皮细胞 (HUVECs) 中的内源性E-选择素.
- 纳米BiT系统与补充的LgBiT片段使细胞表面E-selectin的检测成为可能.
- 实时监测E-选择因表达的反应炎症调解剂.
主要成果:
- 在实时中成功标记和监测内源性E-选择因表达.
- 证明了观察炎症调解剂对E-选择素水平的影响的能力.
- 实现了细胞表面蛋白质动态的敏感检测.
结论:
- 纳米BiT与CRISPR-Cas9相结合,为实时E-selectin监测提供了一个强大的工具.
- 这种方法促进了对炎症性蛋白质变化的敏感检测.
- 为未来的药物发现提供了显著的潜力,针对E-选择素和炎症途径.
更多相关视频
07:05TGF-β-mediated Endothelial to Mesenchymal Transition EndMT and the Functional Assessment of EndMT Effectors using CRISPR/Cas9 Gene Editing
Published on: February 26, 2021
5.2K
08:22CRISPR/Cas9-mediated Targeted Integration In Vivo Using a Homology-mediated End Joining-based Strategy
Published on: March 12, 2018
15.0K