用甘马赛克病毒构造对玉米的注射以及在秋季军中用于RNA干扰的应用

科学领域:

• 植物病毒学 植物病毒学
• 分子生物学分子生物学
• 遗传学 遗传学 是一个

背景情况:

• 病毒介导的基因操纵为植物的功能基因组学提供了有效的工具.
• 甘马赛克病毒 (SCMV) 是Potyviridae家族的一种成员,可以被改造为玉米等单种植物的载体.
• 过渡式表达系统为稳定的转换提供了更快,更经济的替代方案.

研究的目的:

• 描述一种基于SCMV的过时基因表达和玉米基因沉默的协议.
• 为了证明SCMV在昆虫中植物媒介病毒诱导的基因沉默 (VIGS) 的应用.
• 突出SCMV介导系统快速基因功能查的优势.

主要方法:

• 将构造物克隆到pSCMV-CS3等离子体载体中.
• 用pSCMV-CS3构造物对玉米幼苗进行颗粒轰炸,以防止系统性病毒传播.
• 用受感染植物的果汁对健康的玉米幼苗进行注射,以防随后的感染.
• 通过将昆虫基因段插入pSCMV-CS3.3中来生成用于VIGS的转基因病毒.
• 食SCMV感染的玉米植物落军毛虫毛虫诱导基因沉默.

主要成果:

• 在粒子轰炸后,SCMV在玉米中成功复制和系统传播.
• 涂抹注射是对玉米植物的二次感染的有效方法.
• 基于SCMV的VIGS在摄入受感染的玉米植物产生的dsRNA后,有效地使秋季军 (Spodoptera frugiperda) 的目标基因沉默.
• 该协议有助于快速选食用宿主植物的昆虫中的基因功能.

结论:

• 在玉米中,SCMV是短暂基因过度表达和基因沉默的多功能载体.
• 昆虫中SCMV介导的植物诱导的VIGS是功能基因组学的强大工具.
• 这种方法加速了植物和昆虫基因功能的研究,在速度和成本方面提供了显著的优势.