多重复合PCR-侧流滴针方法检测热稳定直接血解素 (TDH) 产生V. 帕拉海莫利蒂克斯 (parahaemolyticus) 是一种
Jirakrit Saetang1, Phutthipong Sukkapat1, Suriya Palamae1
1International Center of Excellence in Seafood Science and Innovation, Faculty of Agro-Industry, Prince of Songkla University, Hat Yai 90110, Songkhla, Thailand.
Biosensors
|July 28, 2023
概括
一种新的多重PCR与侧流滴杆 (LFD) 测定相结合,可以有效地检测海鲜中的致病性Vibrio parahaemolyticus. 这种快速方法为提高食品安全提供了高灵敏度和特异性.
科学领域:
- 食品微生物学 食品微生物学
- 分子诊断学 分子诊断
- 公共卫生 公共卫生
背景情况:
- 活性血栓炎是由于食用海鲜而引起的急性胃肠炎的常见原因.
- 对致病性V. parahaemolyticus的准确和快速检测方法对于食品安全至关重要.
- 现有的方法可能缺乏有效选所需的灵敏度或速度.
研究的目的:
- 开发和验证多重PCR与侧向流量测量棒 (LFD) 试验相结合.
- 为了检测致病性Vibrio parahaemolyticus菌株,针对关键的毒性基因.
- 为食品安全应用建立一个敏感,特定和快速的诊断工具.
主要方法:
- 开发了一种多重PCR测定方法,使用生物素,FAM和Dig结合的原料向热可变血清素 (TLH) 和热稳定直接血清素 (TDH) 基因.
- 优化反应条件和使用阿加凝电泳和通用侧流测量棒的评估性能.
- 评估了对七种食源性病原体的特异性和敏感性,使用目标DNA的连续稀释;用样本进行了验证.
主要成果:
- 多重PCR-LFD测定表明高特异性,没有交叉反应性.
- 检测极限为0.78 ngDNA/凝电泳反应和0.39 ngDNA通过LFD测定.
- 在4小时的丰富后,成功检测出致病性V. parahaemolyticus在10 CFU/10 g的样本上.
结论:
- 开发的多重PCR-LFD测定是一种高度敏感和特定的方法,用于检测致病性V. parahaemolyticus.
- 这种测试提供了一个快速可靠的工具,用于检测海鲜中的病原体.
- 它有可能发展成为食品安全部门的商业检测套件.
