AB5型毒素作为抗日本脑炎病毒复合疫苗中的Pentameric支架

科学领域:

• 病毒学 病毒学
• 疫苗学 疫苗学 疫苗学
• 蛋白质工程是指蛋白质工程.

背景情况:

• 日本脑炎病毒 (JEV) 构成了严重的公共卫生威胁.
• JEV的E蛋白域III (EDIII) 包含一个关键的中和表位.
• 传统的JEV疫苗有局限性,需要新的方法.

研究的目的:

• 开发一个具有成本效益和免疫性的JEV疫苗抗原.
• 使用AB5型毒素作为支架,以米形式呈现JEV EDIII.
• 为了评估由化学抗原诱导的中和抗体反应.

主要方法:

• 在大肠杆菌中,JEV EDIII与霍乱毒素B (CTB) 或耐热性肠毒素B (LTB) 子单元的基因融合.
• 使用RNA介导的伴侣来增强可溶性表达和pentameric组合.
• 使用尺寸排除色谱 (SEC),非减小的凝电泳和GM1结合试验验验证pentameric组件.
• 用仿真CTB/LTB-EDIII抗原对小鼠进行免疫接种,并评估针对JEV.的中和抗体标位.

主要成果:

• 通过与CTB或LTB的基因融合成功生产了homo-pentameric EDIII,而无需重新折叠.
• 通过使用RNA介导的陪伴剂,证明了化学抗原的增强可溶性表达和 pentameric 组合.
• 通过SEC,凝分析和GM1结合,确认了 pentameric 结构和功能.
• 表明CTB/LTB-EDIII仿制抗原诱导了小鼠对JEV纳卡亚马菌株的高水平中和抗体.

结论:

• 细菌通过与AB5型毒素的融合产生一种JEV保护性抗原是可行的.
• 嵌合体抗原既可以作为 pentameric 支架,也可以作为内在辅助剂.
• 这种细菌产生的重组化学抗原代表了对现有的JEV疫苗有希望的,具有成本效益的替代方案.