没有提取的色度测定RT-LAMP检测 SARS-CoV-2 在唾液中
Ane Rivas-Macho1,2, Ane Sorarrain3, José M Marimón3
1Gaiker, GAIKER Technology Centre, Basque Research and Technology Alliance, Parque Tecnológico, Ed. 202, 48170 Zamudio, Spain.
Diagnostics (Basel, Switzerland)
|July 29, 2023
概括
一种新的calcein反转录循环介导异热放大 (RT-LAMP) 方法提供了一种快速,准确和经济有效的方法来检测唾液中的SARS-CoV-2. 这种无提取方法提供了肉眼可见的结果,简化了人口查.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 病毒学 病毒学
- 诊断技术 诊断技术 诊断技术
背景情况:
- 随着COVID-19的流行,人们越来越需要快速,负担得起的病原体检测方法.
- 目前针对SARS-CoV-2的标准RT-qPCR需要长时间的核酸提取.
- 同热放大方法为更快的诊断提供了潜在的替代方案.
研究的目的:
- 开发和评估一种新的,无提取色度反转录循环介导同热放大 (RT-LAMP) 试验,用于在唾液中检测SARS-CoV-2.
- 与商业套件和RT-qPCR相比,评估开发的素RT-LAMP方法的灵敏度和特异性.
主要方法:
- 一个基于素的,没有提取的RT-LAMP协议被优化为唾液样本.
- 样品经过短时间的热处理,然后在63°C进行同热放大.
- 结果通过颜色变化 (色到绿色) 或光以视觉方式进行评估.
主要成果:
- 与RT-qPCR相比,开发的calcein RT-LAMP方法显示了90%的灵敏度和100%的特异性,用于Ct ≤34的唾液样本.
- 该测试显示,与商业色度测量RT-LAMP套件相比,测试的灵敏度和特异性有所提高.
- 该方法实现了与商业光RT-LAMP套件相似的性能,而无需光阅读器.
结论:
- 素RT-LAMP试验提供了一种简单,快速和具有成本效益的诊断工具,用于在唾液中检测SARS-CoV-2.
- 它的视觉读数和没有提取的性质使它适合广泛的人口查.
- 该方法为RT-qPCR提供了可行的替代方案,特别是在资源有限的环境中.
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