N-终端的LysSN-His-tag改善了Bacillus subtilis中细胞内复合蛋白的产生
Ngan Thi Phuong Le1,2, Trang Thi Phuong Phan1,2,3, Tuom Thi Tinh Truong1,2,4
1Center for Bioscience and Biotechnology, University of Science, Ho Chi Minh City, Vietnam.
Cell biochemistry and function
|July 29, 2023
概括
一个新型的融合标签,LysSN-xHis,增强了Bacillus subtilis中的重组蛋白质生产. 这个标签显著增强了像EGFP这样的低表达蛋白质,并改善了像BgaB和GFP+这样的高表达蛋白质.
科学领域:
- * 分子生物学 * 分子生物学
- * 蛋白质表达方式
- * 生物技术 * 生物技术
背景情况:
- * Bacillus subtilis 中的重组蛋白质生产通常受到融合标签选择的限制.
- * N端的His标签可以增加低表达蛋白质水平,但降低高表达蛋白质水平.
- * 对于能有效调节B. subtilis细胞质中蛋白质表达的融合标签,存在有限的选择.
研究的目的:
- *评估新型融合标签LysSN-xHis对增强B. subtilis重组蛋白表达的疗效.
- * 为了研究在LysSN-xHis融合标签中不同的histidine标签长度 (6xHis,8xHis,10xHis) 的影响.
- * 为了比较低表达 (egfp) 和高表达 (gfp+,bgaB) 基因的表达水平,并没有融合标签.
主要方法:
- * EGFP,GFP+和BgaB蛋白质的构造和表达与N端 LysSN-xHis融合标签在 Bacillus subtilis.
- *使用光强度 (EGFP) 和其他相关指标量化蛋白质表达水平.
- *对不同聚变标签结构和未标记对照对蛋白质表达水平的比较分析.
主要成果:
- *与未标记的EGFP相比,LysSN-xHis标签显著提高了EGFP光度的23.5倍.
- * LysSN-xHis的融合导致EGFP表达率比单独的His标签高1.5倍.
- *与His-tag相比,高表达基因BgaB和GFP+的表达水平分别增加了2.9倍和12.5倍.
- * LysSN-xHis 中的西斯蒂丁数变化影响了低表达基因水平,但没有影响高表达基因.
结论:
- * LysSN-xHis融合标签是优化B. subtilis.重组蛋白表达的一个有希望的工具.
- * 这种新的标签有效地增强了低复制蛋白的表达,并调节了高复制蛋白.
- * LysSN-xHis标签为细菌细胞质中蛋白质表达调节提供了一种多功能策略.


