在大鼠肝脏和血中分析类固醇激素的高吞吐量LC-MS/MS方法 - - 解开方法论上的挑战
Sara Evangelista1, Paraskevi Vazakidou1, Jacco Koekkoek1
1Amsterdam Institute for Life and Environment (A-LIFE), Faculty of Science, Vrije Universiteit Amsterdam, the Netherlands.
Talanta
|July 29, 2023
概括
这项研究提出了一种新的LC-MS/MS方法,用于测量大鼠肝脏和血中的23种类固醇激素. 经过验证的试验为新生儿和成年大鼠提供了关键的参考数据,有助于类固醇激素研究.
科学领域:
- 内分泌学 在内分泌学.
- 分析化学 分析化学
- 毒理学 毒理学 毒理学
背景情况:
- 在老鼠模型中,全面的类固醇激素参考数据很少,特别是早期发育和肝脏组织.
- 现有的方法面临复杂的矩阵和特定的酶处理的挑战.
研究的目的:
- 开发和验证一种酶体,固相提取 (SPE) 和液态染色体-并联质谱法 (LC-MS/MS) 方法.
- 为了量化老鼠肝脏和血中的23种类固醇激素,跨越不同的生命阶段.
- 在老鼠中建立新型类固醇激素的参考间隔.
主要方法:
- 使用复合β-葡萄糖酶/硫酶混合物 (BGS混合物) 进行有效的类固醇结合物解结合.
- 采用简化样品制备和高通量96孔板SPE用于复杂矩阵.
- 在小样本体积中 (5-20毫克肝脏,100微升血) 实现了高灵敏度的准确量化.
主要成果:
- 在成年和新生儿大鼠肝脏和血中成功量化了23种类固醇激素.
- 证明方法能够处理方法挑战和潜在干扰的能力.
- 为两性和发育阶段建立了新的类固醇激素参考间隔.
结论:
- 开发的LC-MS/MS方法是一种可靠的诊断工具,用于在老鼠模型中量化类固醇.
- 提供了关于早期发育期间肝脏和血类固醇激素动态的宝贵见解.
- 在临床前研究中扩大了类固醇激素研究的范围.
