通过高含量共聚焦细胞成像对人类T细胞中的二维免疫突触的度量
Guilhèn Prunier1, Beatriz Chaves2, Claire Lacouture1
1Toulouse Institute for Infectious and Inflammatory Diseases (INFINITy), INSERM, CNRS, Toulouse III Paul Sabatier University, Toulouse, France.
Methods in cell biology
|July 29, 2023
概括
我们开发了一种高含量成像协议,用于分析T细胞中的免疫突触 (IS). 这种方法可以在许多样本中进行IS的多参数分类,从而推进T细胞激活研究.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 显微镜的使用方法
背景情况:
- 免疫突触 (IS) 对T细胞-APC通信和T细胞反应大小至关重要.
- IS分子组织,包括细胞骨和器官极化,决定T细胞的功能.
- 目前用于IS分析的显微镜方法具有低通量,限制了全面的研究.
研究的目的:
- 建立一个高含量成像协议,用于对T细胞IS.IS无偏见的多参数分析.
- 为了能够对初级T细胞中的IS参数进行高通量评估.
- 为了促进健康,疾病和治疗应用的T细胞激活监测.
主要方法:
- 开发了一种使用384井板格式的高含量共聚焦显微镜协议.
- 在刺激分子上调整了用于初级T细胞形成IS的无偏分析的协议.
- 专注于染色CD8+T细胞中的F-actin, pericentrin和granzyme B,适应其他标记物和细胞类型.
主要成果:
- 成功实施了用于T细胞IS成像的高通量协议.
- 启用了IS在大型格式中的多参数表征.
- 证明了该协议对各种分子标记物和淋巴细胞子集的适应性.
结论:
- 开发的高含量成像协议显著提高了T细胞IS分析的吞吐量.
- 这种方法允许IS的综合性,多参数分类,这对于理解T细胞激活至关重要.
- 该协议有望推动T细胞研究在健康,疾病和治疗干预方面取得进展.
