开发异热复合酶聚合酶放大试验,用于快速检测Capripoxvirus属的病毒
Libing Liu1, Jinfeng Wang1, Fuping Nie2
1Technology Center of Shijiazhuang Customs, Shijiazhuang 050051, China.
Journal of virological methods
|July 30, 2023
概括
新的重组酶聚合酶放大 (RPA) 试验提供了快速的,特定的检测,像羊病毒 (SPPV) 和山羊病毒 (GTPV) 的capripoxvirus (CaPV). 这些用户友好的方法非常适合资源较少的环境,有助于疾病控制.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 分子诊断学 分子诊断
- 病原体检测检测 病原体检测
背景情况:
- 卡普里波克病毒 (CaPV),包括羊病毒 (SPPV),山病毒 (GTPV) 和块性皮肤病病毒 (LSDV),是影响牲畜的重要病原体.
- 快速准确地检测CaPV对于疾病控制,预防传播和根除工作至关重要.
研究的目的:
- 开发和评估用于快速检测CaPV.的复合酶聚合酶放大 (RPA) 试验.
- 创建实时光 (实时RPA) 和肉眼可见的侧流带 (LFS RPA) 格式,用于多功能应用.
主要方法:
- 开发实时RPA和LFS RPA测试,以 CaPV 为目标.
- 在39°C和20分钟化时间下测试测试性能.
- 评估针对非向病原体和宿主DNA的特异性,并确定检测极限 (LOD).
主要成果:
- 两项RPA试验都显示了对SPPV,GTPV和LSDV的高特异性,没有交叉反应.
- 实时RPA的LOD为1.0 × 102副本/反应,LFS的RPA为1.0 × 101副本/反应.
- 在人工污染样本中,RPA测定结果与实时PCR相关性良好,并在临床样本分析中显示出有前途.
结论:
- 开发的RPA测定是特定的,敏感的,并且对于快速检测CaPV的用户友好.
- 这些测试为CaPV诊断提供了可行的替代方案,特别是在资源有限的环境中.
- LFS RPA 格式提供了一种适合现场部署的快速视觉检测方法.
