通过兰化物元素标记和ICP-MS来绝对量化小细胞外囊的动态细胞摄入量
Ningli Yang1, Chuanping Zhao2, Linlin Kong1
1National Center for Protein Sciences Beijing, State Key Laboratory of Proteomics, Beijing Proteome Research Center, Beijing Institute of Lifeomics, Beijing 102206, P. R. China.
Analytical chemistry
|August 1, 2023
概括
研究人员开发了一种新的方法来量化小细胞外囊泡 (sEVs) 的细胞吸收,使用兰化物标记和ICP-MS. 这种技术可以精确测量细胞内化的sEVs,从而推进细胞间通信的研究.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 纳米技术纳米技术
背景情况:
- 小型细胞外囊泡 (sEVs) 是生理和病理过程的关键媒介.
- 细胞吸收sEVs显著影响受体细胞的功能.
- 准确量化sEV吸收及其与细胞表型的相关性仍然具有挑战性.
研究的目的:
- 开发一种新的,敏感的,绝对的量化策略,用于sEVs的细胞吸收.
- 建立一种将sEV内化与受体细胞变异相关联的方法.
- 为了研究sEV细胞吸收的机制.
主要方法:
- 通过在sEV膜上用酸盐组进行合,对sEVs进行兰化物元素标记 (Europium-Eu3+).
- 感应合等离子体质谱 (ICP-MS) 用于对标记的sEV进行敏感量化.
- 使用化学内细胞酶抑制剂抑制sEV吸收的分析.
主要成果:
- 在不改变sEV结构或功能的情况下,证明了高的EU标签效率和稳定性.
- 在HeLa细胞中量化绝对sEV吸收为4020±171颗粒/细胞在37°C,在4°C有61%的抑制.
- 确定了巨型皮诺细胞症作为HeLa细胞中sEV吸收的主要途径 (23%的抑制).
结论:
- 开发的兰化物标签和ICP-MS方法提供了易于,敏感 (ppb级) 和绝对量化的SEVs.
- 这一策略为研究sEVs在细胞内通信和货物运输中提供了有价值的工具.
- 了解sEV吸收机制对于利用其治疗潜力至关重要.
