建立单克隆抗体和scFv基于免疫的测定,用于Cry2Aa毒素在的谷物样本中
Cheng Shen1, Jia Hao1, Yihang Li1
1Key Laboratory of Food Quality and Safety of Jiangsu Province, Nanjing, 210014, China; College of Plant Protection, Nanjing Agricultural University, Nanjing, 210095, China.
Analytical biochemistry
|August 2, 2023
概括
新的免疫测试方法提供了成本效益高的检测Bacillus thuringiensis (Bt) Cry2Aa毒素. 这些敏感测试,包括IC-ELISA,DAS-ELISA和CLEIA,适用于监测农业样本中的Cry毒素.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 农业科学 农业科学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 细菌 thuringiensis (Bt) 毒素对于对转基因生物 (GMO) 的害虫控制至关重要.
- 为了风险评估和监测,需要有效和具有成本效益的Cry2Aa毒素检测方法.
研究的目的:
- 开发和验证具有成本效益的免疫测试方法,用于检测Bacillus thuringiensis (Bt) Cry2Aa毒素.
- 为了比较Cry2Aa毒素量化不同免疫测试格式的灵敏度和适用性.
主要方法:
- 开发了三种免疫测试方法:抑制竞争性酶链接免疫吸收测试 (IC-ELISA),双抗体三明治酶链接免疫吸收测试 (DAS-ELISA) 和化学发光免疫测试 (CLEIA).
- 使用单克隆抗体 (mAb) 作为检测抗体.
- 评估了基于单链可变片段 (scFv) 的试验的性能,以提高灵敏度.
主要成果:
- 成功开发了具有不同灵敏度的IC-ELISA,DAS-ELISA和CLEIA.
- 基于mAb的IC-ELISA显示IC50为10.65微克/毫升.
- 与基于mAb的测定相比,基于scFv的DAS-ELISA和CLEIA在较低的检测极限 (LOD) 和定量极限 (LOQ) 上显示出更高的灵敏度.
- 从加的谷物样本中成功检测出Cry2Aa毒素,验证了开发的方法的实际应用.
结论:
- 开发的免疫测试方法为检测Cry2Aa毒素提供了良好的灵敏度,稳定性和适用性.
- 基于scFv的测定提供了对Cry2Aa.Aa的超敏感检测能力.
- 这些方法是监测Cry毒素和支持风险评估策略的宝贵工具.
