在麻豆中开发基于麻豆常见马赛克病毒的载体,用于麻豆中的蛋白质表达和基因编辑
Decai Tuo1, Yuan Yao1, Pu Yan1
1National Key Laboratory for Tropical Crops Breeding, Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Tropical Crops (Ministry of Agriculture and Rural Affairs), Hainan Key Laboratory for Protection and Utilization of Tropical Bioresources, Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, Sanya Research Institute, Hainan Institute for Tropical Agricultural Resources, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou & Sanya, Hainan, China.
Plant methods
|August 3, 2023
概括
研究人员开发了一种新的麻豆病毒载体,用于蛋白质过度表达和基因编辑. 这种工具使得高效的基因功能研究和木麻植物的精确育种成为可能.
科学领域:
- 植物病毒学 植物病毒学
- 分子生物学分子生物学
- 功能性基因组学是一种功能性基因组学.
背景情况:
- 病毒媒介过度表达 (VOX),基因沉默 (VIGS) 和基因组编辑 (VIGE) 对植物功能基因组学至关重要.
- 基于木常见马赛克病毒 (CsCMV) 的VIGS载体已经确立,但木缺乏VOX和VIGE载体.
研究的目的:
- 开发高效的VOX和VIGE载体用于麻豆使用修改后的CsCMV骨干.
- 为了增强异质蛋白表达,并使麻中的基因编辑应用成为可能.
主要方法:
- 修改了基于CsCMV的VIGS载体,增加了重复的亚基因组促进体 (SGP1) 的长度.
- 设计了CsCMV2-NC向量来表达GFP,crtB和XopAO1,用于跟踪,生物强化和效应物识别.
- 利用CsCMV2-NC传递单向导RNA (gMePDS1/2) 以准Cas9-表达系中的麻植物脱酶 (MePDS) 基因.
主要成果:
- 成功开发了CsCMV2-NC载体,用于中高效的异质蛋白表达.
- 证明了载体对病毒感染跟踪,胡卜素生物强化和毒性效应因子识别的实用性.
- 在MePDS基因中实现了高效的删除突变,导致系统感染麻叶的白色表型.
结论:
- CsCMV2-NC 载体为蛋白质表达提供了快速有效的工具,并指导麻中的RNA递送.
- 这一进步扩大了基于CsCMV的载体的应用范围,用于基因功能研究,生物技术和子精密育种.
