人类雌激素受体补充DNA的序列和表达.

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 遗传学 是一个遗传学.
• 内分泌学 在内分泌学.

背景情况:

• 在真核生物中,类固醇激素受体基因调节的确切机制尚不清楚.
• 雌激素受体 (ER) 功能在细胞过程中至关重要,包括乳腺癌的发展.

研究的目的:

• 在非人类细胞系中克隆,测序和表达功能性人类雌激素受体 (ER).
• 描述表达的ER蛋白,并研究其结构和功能性质.
• 探索ER和其他相关蛋白质之间的进化关系.

主要方法:

• 测序一个补充DNA (cDNA) 克隆,编码来自MCF-7乳腺癌细胞的人类ER mRNA的完整翻译部分.
• 在中国仓鼠卵巢 (CHO-K1) 细胞中表达ER cDNA以产生功能蛋白.
• 生物化学表征包括 [3H] 雌激醇结合试验,糖分梯度沉积和单克隆抗体确认.
• 氨基酸序列与其他类固醇受体和瘤基因产物进行比较.

主要成果:

• 在CHO-K1细胞中成功表达了一种功能性人类ER蛋白.
• 表达的蛋白质表现出特定的 [3H] 雌二醇结合和特有的沉性质 (4S在盐中,8-9S没有盐).
• 单克隆抗体分析证实了表达的蛋白质与人类ER相同.
• 在人类ER,人类葡萄糖皮质体受体和v-erbA瘤基因产物之间确定了显著的区域同质性,特别是在氨酸,氨酸和氨酸丰富的区域.

结论:

• 该研究成功地在异质表达系统中产生并表征了一种功能性的人类雌激素受体.
• 这些发现支持这样一个假设:类固醇受体基因和v-erbA瘤基因具有共同的进化起源.
• 已识别的同源区域被提出为这些相关蛋白质的DNA结合域.