从模型和作物种子中高通量绝对量化蛋白质结合的托芬

科学领域:

• 植物生物化学 植物生物化学
• 分析化学 分析化学
• 蛋白质组学是指蛋白质组学.

背景情况:

• 精确量化必不可少的氨基酸,如酸 (Trp) 对于植物科学至关重要.
• 现有的Trp分析方法可能耗时且需要大量的样本.
• 需要高通量方法来高效地分析大量植物样本.

研究的目的:

• 开发和验证一个高通量协议,以绝对量化与蛋白质结合的托 (Trp).
• 为了从少量的植物组织中实现精确和可重复的Trp测量.
• 调整协议以分析各种植物种子类型.

主要方法:

• 植物组织的毫克级性水解.
• 使用液体染色学-并联质谱学 (LC-MS/MS) 与多重反应监测 (MRM) 的绝对量化.
• 使用96井板格式进行高通量样本处理,并将L-Trp-d5作为内部标准.

主要成果:

• 该协议允许每周分析数百个样本.
• 每个样本只需要大约4毫克的组织.
• 在量化受约束的Trp.证明了高精度,准确性和可重复性.

结论:

• 本协议提供了一种高效可靠的方法,用于植物种子中绝对的托量化.
• 该方法适用于各种植物物种,包括Arabidopsis thaliana,Glycine max和Zea mays.
• 该协议的高通量性质有利于进行大规模的植物代谢学研究.