建立由Gallus gallus衍生的卵管上皮细胞系的协议,使用Percoll进行复合蛋白的体外验证
Chiron Loubser1, Natalya V Nikitina1
1University of the Witwatersrand, School of Molecular and Cell Biology, Johannesburg, Gauteng 2000, South Africa.
STAR protocols
|August 5, 2023
概括
这项研究引入了一种新方法,可以从卵管中分离纯上皮细胞,克服验证治疗蛋白质的局限性. 这种技术使得这些细胞中的复合抗体能够有效地表达.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 细胞生物学 细胞生物学
- 动物科学动物科学
背景情况:
- 转基因的治疗蛋白质在体外验证受到纤维细胞污染的阻碍.
- 目前的方法缺乏用于蛋白质表达研究的纯上皮细胞的有效隔离.
研究的目的:
- 开发一种协议,从卵管管状腺中分离纯上皮细胞.
- 建立一种表达重组蛋白质的方法,特别是IgG抗体,在这些孤立的细胞中.
主要方法:
- 解决方案制备,组织采集和处理的详细协议.
- 珀科尔密度离心法用于将上皮细胞与纤维细胞分离.
- 在隔离的上皮细胞系中建立一个重组IgG抗体表达系统.
主要成果:
- 成功地从卵管管腺中分离出纯上皮细胞.
- 证明了Percoll密度离心法在去除污染性纤维细胞方面的有效性.
- 在净化的上皮细胞系中实现了重组IgG抗体的表达.
结论:
- 开发的协议提供了一种可靠的方法来获得纯卵管上皮细胞.
- 这一进步有助于改善治疗蛋白质的体外验证和鸟类系统中的复合抗体生产.


