通过CRISPR-Cas9核糖核蛋白 (RNP) 电穿孔产生双重淘汰牛

科学领域:

• 农业科学 农业科学
• 动物遗传学动物遗传学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 由于生物和技术的局限性,牛的基因组编辑具有挑战性.
• 像微注射和SCNT这样的传统方法复杂且昂贵.
• 电穿孔为牛基因组编辑提供了一个有前途的替代方案.

研究的目的:

• 评估电穿孔在牛胚胎中基因组编辑的效率.
• 评估使用这种方法生产基因组编辑牛的可行性.
• 建立一种更容易获得的方法,用于牛精密育种.

主要方法:

• 利用电穿孔将CRISPR-Cas9核糖蛋白 (RNP) 复合物输送到牛胚胎中.
• 使用T7E1试验证实MSTN,PRNP和BLG基因的编辑效率.
• 将编辑的胚胎转移给代孕母亲,并通过有针对性的深度测序分析产生的小牛的突变.

主要成果:

• 在胚胎中实现了高突变率:MSTN (57.6%),PRNP (54.6%) 和联合MSTN/BLG (83.9%/84.5%).
• 成功生产了基因组编辑的小牛,其中有一只双击的MSTN/PRNP小牛和四只双击的MSTN/BLG小牛.
• 证明了电穿孔的成功应用,用于产生转基因牛.

结论:

• 电解RNP是生产基因组编辑牛的有效方法.
• 生产的MSTN/PRNP (牛肉) 和MSTN/BLG (奶牛) 牛,对未来的研究有价值.
• 这种技术在畜牧业中推进了精确的育种策略.