单层石墨烯应用于冷电子显微镜网格,用于高分辨率的结构确定
Andrew V Grassetti1, Mira B May1, Joseph H Davis1,2
1Department of Biology, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge, MA 02139.
bioRxiv : the preprint server for biology
|August 7, 2023
概括
涂上石墨烯的网格可以改善低温电子显微镜 (cryo-EM) 的样本准备. 这种方法提高了粒子分布,并促进了高分辨率结构的确定,克服了关键的冷-EM工作流程瓶.
科学领域:
- 结构生物学 结构生物学
- 生物物理学的生物物理.
- 材料科学 材料科学 材料科学
背景情况:
- 低温电子显微镜 (cryo-EM) 对于确定宏分子近原子分辨率结构至关重要.
- 样本准备是冷EM的一个重要瓶,通常受到玻璃体冰中的样本表现不佳的限制.
- 涂上石墨烯的网格为改善样品呈现和颗粒分布提供了一个有前途的解决方案.
研究的目的:
- 为将石墨烯应用于冷EM电网提供详细的协议.
- 建立评估石墨烯网的水友性和确认石墨烯存在的方法.
- 为了证明石墨烯支在冷-EM工作流程中的有效性.
主要方法:
- 冰冷-EM电网的石墨烯涂层.
- 快速评估电网的水友性.
- 电子显微镜 (EM) 基于使用衍射模式确认石墨烯.
- 化电磁场数据收集和图像处理.
主要成果:
- 详细介绍了石墨烯应用和表征的详细协议.
- 石墨烯涂层可以增加颗粒密度,减少空气-水接口相互作用.
- 一个Cas9复合体的2.7 Å分辨率密度图用石墨烯支器快速重建.
结论:
- 涂上石墨烯的网格代表了冷EM样本准备的重大进步.
- 这些协议可以实现更高效和有效的冷-EM工作流程.
- 该方法使高分辨率的结构确定更容易,即使在低度样本.


