室温稳定的循环介导同热放大 (LAMP) 试剂,用于检测勒托螺旋DNA
Pui-Yuei Lee1, Yien-Ping Wong1, Shuhaidah Othman1
1Department of Medical Microbiology and Parasitology, Faculty of Medicine and Health Sciences, Universiti Putra Malaysia, 43400 Serdang, Selangor, Malaysia.
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|August 8, 2023
概括
糖稳定了循环介导同热放大 (LAMP) 试剂,允许室温储存,并提高了在资源有限的环境中提高子体检测可行性.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 微生物学 微生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 循环介导异热放大 (LAMP) 提供了快速检测LeptoSpira物种.
- 目前的LAMP方法需要冷藏Bst DNA聚合酶活性,限制了现场应用.
研究的目的:
- 为了提高预混合LAMP试剂的稳定性.
- 通过结合稳定剂来消除冷藏的需要.
主要方法:
- 作为稳定剂,LAMP试剂的配方包括使用和不使用糖糖.
- 试剂的稳定性通过在室温下保存长达60天来评估.
- 使用大鼠脏样本测试放大效率,以检测不同间隔的LeptoSpiral DNA.
主要成果:
- 含糖的预混合LAMP试剂在室温下经过45天的稳定性.
- 没有糖的LAMP试剂在初始储存后没有放大,表明活性丧失.
- 糖糖有效地保留了Bst DNA聚合酶的酶活性.
结论:
- 糖可以作为LAMP试剂的有效稳定剂,使室温储存成为可能.
- 这一修改显著提高了LAMP在资源有限的环境中进行白病监测的实用性.
- 该开发支持分子诊断的更广泛的领域应用.
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