从大肠杆菌产生生物活性的人类PAX4蛋白质
Gloria Narayan1, Akriti Agrawal1, Plaboni Sen2
1Laboratory for Stem Cell Engineering and Regenerative Medicine, Department of Biosciences and Bioengineering, Indian Institute of Technology Guwahati, Guwahati, 781039, Assam, India.
The protein journal
|August 8, 2023
概括
研究人员产生了生物活性复合人偶盒4 (PAX4) 转录因子. 这种蛋白质表现出瘤抑制活性,为疾病研究和细胞重编程提供了潜力.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生化学
背景情况:
- 配对盒4 (PAX4) 是胰腺发育和成人β细胞功能的关键转录因子.
- 在人类黑色素瘤中,PAX4还起到瘤抑制作用.
研究的目的:
- 为了产生生物活性复合人PAX4转录因子.
- 调查复合PAX4的功能性质,包括其瘤抑制活性.
主要方法:
- 将PAX4基因克隆成表达载体 (pET28a(+) -HTN-PAX4和pET28a(+) -PAX4-NTH).
- 来自大肠杆菌 (E. coli) 的HTN-PAX4和PAX4-NTH融合蛋白的表达和净化.
- 通过细胞迁移,增殖和细胞循环试验,评估蛋白质结构,细胞内化和生物活性.
主要成果:
- 成功生产和净化功能PAX4融合蛋白 (产量为3.15毫克和0.83毫克).
- 证明了PAX4蛋白质的二次结构的保留和内化到哺乳动物细胞和细胞核的能力.
- 在基于细胞的测试中,PAX4融合蛋白显示出瘤抑制活性.
结论:
- 生物活性复合人体PAX4已成功产生.
- 重组PAX4作为一种瘤抑制蛋白,验证其在细胞过程中的作用.
- 这项研究为研究PAX4在疾病和细胞重编程应用中提供了宝贵的工具.
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