在无肝素生长介质中使用LipofectamineTM 2000进行脂感染,从而在原始生殖细胞中产生高的转感染效率
Tenkai Watanabe1, Yuta Ochi1, Ryota Kajihara1
1Laboratory of Immunobiology, Graduate School of Integrated Sciences for Life, Hiroshima University, Higashi-Hiroshima, Japan.
Biotechnology journal
|August 10, 2023
概括
研究人员通过优化细胞转染改进了的基因编辑. 添加质氨酸恢复了由肝素减少的效率,使得原始生殖细胞中的高效基因组编辑能够用于未来的应用.
科学领域:
- 动物生物技术动物生物技术
- 遗传学 遗传学 是一个
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 的基因组编辑对于生产转基因鸟类至关重要.
- 原始生殖细胞 (PGC) 的低转染效率阻碍了高效的基因组编辑.
- 目前的方法在实现高产量的修改PGCs方面面临挑战.
研究的目的:
- 为了提高原生殖细胞 (PGC) 的转化效率.
- 为了在中建立CRISPR/Cas9介导的基因组编辑的最佳条件.
- 为研究和应用促进基因组编辑的产生.
主要方法:
- 利用脂化进行基因转移到的PGC中.
- 研究了氨酸对脂质过量效率的抑制作用.
- 确定了最佳的转染试剂 (利波胺2000) 和PGC介质.
- 使用CRISPR/Cas9.9评估基因淘汰和淘汰效率.
主要成果:
- 氨酸显著降低了肉PGCs的脂消化效率.
- 添加质氨酸恢复了肝素受损的脂裂效率.
- 经过优化脂肪切除协议,可以实现高基因编辑效率.
- 证明了成功的基因敲除卵和基因敲除在ACTB位点的证明.
结论:
- 优化的脂肪切除协议显著改善了PGCs中的基因组编辑.
- 这种方法为生成基因组编辑提供了有价值的工具.
- 这些发现支持了鸟类生物技术和遗传研究的进步.
