使用超分辨率显微镜分析活体培养的人类心房附属组织的瘤网络分析
Oleksandra Chabanovska1,2,3, Heiko Lemcke1,2, Hermann Lang3
1Reference and Translation Center for Cardiac Stem Cell therapy (RTC), Department of Cardiac Surgery, Rostock University Medical Center, 18057, Rostock, Germany.
Scientific reports
|August 10, 2023
概括
人类心房附属体为心脏研究提供了宝贵的来源. 然而,在体外培养的肌肉心脏切片,尽管具有持续的代谢活性,但却呈现出快速的结构性降解,限制了它们的使用到短期研究.
科学领域:
- 心血管生物学 心血管生物学
- 组织工程是组织工程.
- 细胞生理学 细胞生理学
背景情况:
- 研究原生人类心脏组织对于研究至关重要,但受限于低可访问性.
- 在手术过程中经常被丢弃的心房附属物,是人类心肌的潜在来源.
- 保存心脏组织需要有效的培养方法来保持生命力和结构.
研究的目的:
- 评估使用人类心房附属体衍生的心肌切片用于ex vivo研究的可行性.
- 在特定培养条件下评估这些片的结构完整性和代谢活性.
- 为了确定在实验环境中使用这些心肌结构的最佳持续时间.
主要方法:
- 从人类左心房附属体中准备了活生生的心肌切片.
- 用空气液体接口系统培养切片长达10天.
- 通过MTT测定测量代谢活性;通过超分辨率显微镜测量结构完整性;通过qRT-PCR测量基因表达.
主要成果:
- 在三天内观察到收缩装置的显著分解 (α-actinin降解).
- 代谢活动保持高水平长达7天.
- 关键心脏标记物的基因表达在培养一天后显著下降.
结论:
- 静态培养心房附属体心肌切片仅适用于短期实验,例如药物测试.
- 快速的结构降解表明对外生条件的破坏性反应.
- 通过电机刺激协议可以实现长期完整性.
