脂质纳米粒子介导的信使RNA传递用于自然杀手细胞的ex vivo工程

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 生物技术是生物技术.
• 细胞疗法细胞疗法

背景情况:

• 自然杀手 (NK) 细胞对于天生的免疫力至关重要,可以消除癌症和病毒感染的细胞.
• 鉴于NK细胞的低毒性和独立于先前激活,NK细胞正在被用于采用细胞疗法 (ACT).
• 用mRNA对NK细胞进行工程可以改善瘤向和细胞毒性,但目前的传染方法如电穿孔有局限性.

研究的目的:

• 研究聚合物和脂质纳米粒子 (LNP) 配方,以有效地将mRNA传递给NK细胞.
• 为了比较基于LNP的交付与传统的方法,如电穿孔和多重复合.
• 在ACT中确定NK细胞工程的最佳非病毒传递系统.

主要方法:

• 使用聚合纳米粒子 (基于二甲基乙胺和二甲基乙胺库) 和含有各种可电离性脂质的脂质纳米粒子 (LNP) 评估mRNA输送.
• 通过调整脂质组成和微流体参数来为eGFP-mRNA输送,优化了LNP配方.
• 评估NK (KHYG-1) 和T (Jurkat) 细胞系中的转染效率和蛋白质表达,以及带血衍生的NK细胞.

主要成果:

• 聚合物纳米颗粒显示了有限的NK细胞内化和低的转染效率.
• 优化的mRNA-LNP在NK细胞中实现了大约100%的转染效率和高蛋白表达.
• 与多重复和电穿孔相比,LNP表现出更高的传染效率和eGFP表达.

结论:

• 脂质纳米颗粒 (LNP) 是NK细胞中mRNA的高效非病毒传递系统.
• 优化的LNP克服了现有的转染方法的局限性,从而实现了增强的NK细胞工程.
• 基于LNP的mRNA输送是推进基于NK细胞的新型免疫疗法的有希望的策略.