同时LC-MS测定由干细胞衍生小岛器官分泌的葡萄糖调节

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 分析化学 分析化学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 干细胞衍生小岛器官 (SC小岛) 对糖尿病研究至关重要.
• 在器官芯片 (OoC) 平台上研究SC岛屿需要强大的分析方法.
• 对于SC小岛的荷尔蒙量化现有方法有局限性.

研究的目的:

• 开发和验证一个逆相液态色谱-并联质谱法 (RPLC-MS/MS) 方法.
• 为了能够同时量化关键的小岛激素:胰岛素,体静止素-14和葡萄糖.
• 评估该方法适用于在OOC平台上培养的SC岛屿的适用性.

主要方法:

• 开发了一种RPLC-MS/MS方法,使用/-C18列和三重四极质谱.
• 优化用于同时测定胰岛素,体静止素-14和葡萄糖.
• 对于矩阵稳定性,低转移率 (<2%),高精度 (±10% RSD) 和精度 (±15%的相对误差) 进行验证.

主要成果:

• 达到量化的低极限:0.2微克/升 (胰岛素),0.1微克/升 (体静止素-14) 和0.05微克/升 (葡萄糖).
• 在SC岛屿中证明了依赖葡萄糖的胰岛素反应.
• 通过SC岛屿确认产生和释放体静止素-14和葡萄糖.
• 该方法证明与在回流式OoC (rOoC) 平台上从SC岛屿收集未过的样本相兼容.

结论:

• 开发的RPLC-MS/MS方法对于多激素测量具有强大,精确和准确性.
• 这种分析方法非常适合在OOC平台上研究SC岛屿.
• 该方法支持SC小岛的功能性特征,包括激素分泌动态.