在体外方法研究结膜杯细胞的基于性别的差异.
Jeffrey A Bair1, Darlene A Dartt1, Menglu Yang2
1Department of Ophthalmology Schepens Eye Research Institute, Massachusetts Eye and Ear, Harvard Medical School.
Journal of visualized experiments : JoVE
|August 14, 2023
概括
研究人员开发了一种从细胞培养基中去除外源激素的方法,这对于研究结膜杯细胞 (CGC) 的基于性别的差异至关重要. 这种技术确保CGC保持正常功能,这对于干眼疾病研究至关重要.
科学领域:
- 眼科医生 眼科 眼科
- 细胞生物学 细胞生物学
- 内分泌学 在内分泌学.
背景情况:
- 干眼疾病是多因素的,影响眼睛表面的健康,女性患病率更高.
- 由结膜杯细胞 (CGC) 分泌的粘素的破坏有助于眼睛表面疾病.
- 培养介质中的外源性激素可以混体外研究中CGC的基于性别的差异.
研究的目的:
- 描述一种在CGC培养物中最大限度地减少外源激素的方法.
- 在激素清除过程中维持CGCs的生理功能.
- 为了使基于性别的CGC差异在体外的一致性研究.
主要方法:
- 来自人类捐赠者的结膜杯细胞 (CGC) 被培养.
- 在实验前48小时,细胞被转移到没有红的RPMI介质中,其中含有1%的BSA.
- 使用fura 2/acetoxymethyl (AM) 显微镜测量了对卡巴胆刺激的细胞内 ([Ca2+]i) 反应.
主要成果:
- 在48小时后,CGC在没有红的介质中保持正常功能.
- 与完整介质相比,没有观察到细胞内 ([Ca2+]i) 反应的显著差异.
- 这种方法有效地消除了外源激素,而不会改变CGC的生理功能.
结论:
- 没有醇红的RPMI介质含有1%的BSA被推用于研究CGC的基于性别的差异.
- 这种方法可以去除外源激素,同时保持正常的CGC功能.
- 对于精确研究眼皮表面健康和疾病的基于性别的变化至关重要.
