测量NLR寡合化II:通过共聚焦显微镜和免疫光检测ASC光斑形成
Lea Jenster1, Lucas S Ribeiro1, Bernardo S Franklin1
1Institute of Innate Immunity, Medical Faculty, University of Bonn, Bonn, Germany.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|August 14, 2023
概括
这项研究详细介绍了三种显微镜方法来可视化ASC斑点,这是炎症酶激活的关键指标. 这些协议使研究人员能够研究先天性免疫反应和细胞死亡途径,如热亡.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 炎症细胞是天生的免疫传感器,可以检测感染,压力或代谢问题.
- 在激活后,ASC蛋白形成可见的"ASC斑点",这对卡斯帕酶-1激活和热致死至关重要.
- ASC斑点作为直接读取炎症酶激活的信号.
研究的目的:
- 介绍三种用于成像ASC斑点的详细协议.
- 促进对炎性酶激活及其后果的研究.
- 在各种细胞环境中提供可视化和量化ASC斑点的方法.
主要方法:
- 用光ASC融合蛋白对巨细胞系的活细胞成像.
- 在人体初级细胞中内源性ASC的免疫光染色.
- 图像流细胞计用于单细胞可视化和ASC斑点的量化.
主要成果:
- 建立了使用显微镜技术可视化ASC点的协议.
- 在不同的细胞类型中证明了可行性,包括初级人体细胞.
- 能够在单细胞水平上对ASC斑点形成进行定量分析.
结论:
- 提出的协议为研究炎症酶激活提供了可访问的方法.
- 可视化ASC斑点是先天免疫信号的宝贵上游读取.
- 这些技术可以促进对炎症性疾病和热的研究.
