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Updated: Jul 19, 2025

Endogenous Protein Tagging in Human Induced Pluripotent Stem Cells Using CRISPR/Cas9

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Published on: August 25, 2018

用CRISPR-Cas9生成表位标签的敲进小鼠,以研究内源蛋白的功能

¹Center for the Genetics of Host Defense, University of Texas Southwestern Medical Center, Dallas, TX 75390, USA; Division of Endocrinology, Department of Internal Medicine, University of Texas Southwestern Medical Center, Dallas, TX 75390, USA.

|August 16, 2023

概括

研究人员开发了一种CRISPR-Cas9基因编辑协议,以创建表位标签的敲进小鼠. 这种方法克服了抗体的局限性,使得在小鼠模型中更好地研究内源性蛋白质功能.

科学领域:

分子生物学分子生物学
遗传学是一个遗传学.
免疫学免疫学免疫学

背景情况:

研究小鼠内源蛋白质对于理解生理学和疾病至关重要.
抗体可用性和特异性的限制阻碍了体内蛋白质研究.
克里斯普尔-Cas9技术提供精确的基因编辑能力.

研究的目的:

提出一种使用CRISPR-Cas9.9生成表位标签的协议.
为了指导研究人员对标签选择,敲入位点和CRISPR设计.
详细介绍小鼠生成,基因定型和验证的过程.

主要方法:

在CRISPR-Cas9中介的基因编辑中进行敲进.
皮质标签的选择和战略敲门地点的确定.
用于小鼠生成,基因型定型和验证的逐步协议.

主要成果:

成功生成了表位标签的敲进小鼠.
研究内源性蛋白质局部化和相互作用的证明可行性.
建立了一种可复制的方法来生成转基因小鼠模型.

结论:

基因编辑CRISPR-Cas9提供了一个强大的方法来创建表位标签敲进小鼠.
这种方法通过克服抗体限制,增强了对内源蛋白功能的研究.
该协议促进了用于生理和病理研究的小鼠模型的进步.

关键词:

克里斯普尔是什么意思?克里斯普尔是什么意思?遗传学是一个遗传学.

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