睡眠美容套件提供快速和易于获得的人工抗原呈现细胞的生成,用于自然杀手细胞扩张
Lachlan J Dobson1, Sarah C Saunderson1, Samuel Wj Smith-Bell1
1Department of Microbiology and Immunology, The University of Otago, Dunedin, New Zealand.
Immunology and cell biology
|August 16, 2023
概括
人工抗原呈现细胞 (aAPC) 提供了一种具有成本效益的方法,用于扩展仿真抗原受体 (CAR) -T和NK细胞. 一种新的单步技术使得可重复的内部生产有效的细胞扩张aAPCs成为可能.
科学领域:
- 免疫学和细胞疗法
- 分子生物学和基因工程分子生物学和基因工程
背景情况:
- 人工抗原呈现细胞 (aAPC) 是扩展仿真抗原受体 (CAR) -T和NK细胞的宝贵工具,特别是低频抗原反应性淋巴细胞.
- 由于可访问性问题和复杂的基因传输协议,aAPC生成的现有方法可能具有挑战性.
- 由于缺乏MHC表达,K562衍生的aAPC对于NK细胞扩张是有用的,防止异性T细胞的增殖.
研究的目的:
- 开发一种简化的一步方法,用于生成人工抗原呈现细胞 (aAPC).
- 为了规避aAPC生产中代的lentiviral基因转移和抗体介导分类的需要.
- 为了使方便和可复制的内部生成有效的aAPCs用于初级细胞的体外扩张.
主要方法:
- 开发基于睡眠美女 (SB) 的载体,其中含有共刺激分子 (CD86,4-1BBL),膜结合细胞因子 (mbIL-15,mbIL-21) 和抗生素耐药性基因的基因.
- 用SB载体对K562料细胞进行单步转化,然后使用两种抗生素同时进行转化和抗生素选择.
- 使用生成的aAPC扩展NK细胞,然后通过lentiviral CAR转导对扩展的NK细胞进行工程.
主要成果:
- 成功生成K562衍生的aAPCs,表达CD86,4-1BBL,mbIL-15和mbIL-21. 这些aAPCs的成功生成.
- 使用开发的aAPCs,NK细胞的高纯度扩张 (80-95%).
- 证明工程扩展NK细胞用于CAR治疗的可行性.
结论:
- 开发的基于SB的单步向量系统为内部APC生产提供了一种方便和可重复的方法.
- 这种方法简化了aAPC的生成,克服了现有方法的局限性.
- 公开可用的多载体套件有助于生产有效的aAPCs,用于用于免疫治疗的初级细胞的体外扩张.
