在癌细胞中进行金属药物研究的细胞溶解方法的批判性评估

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 材料科学 材料科学 材料科学
• 在瘤学瘤学.

背景情况:

• 细胞内积累研究对于金属药物开发至关重要.
• 细胞溶解协议结果的变化可能会阻碍进展.
• ([Ru]) 抗癌复合体需要优化分析方法.

研究的目的:

• 为了比较不同的癌细胞溶解方法用于金属药物研究.
• 评估基于蛋白质含量和 ([Ru]) 积累的溶解协议.
• 确定[Ru(cym) ((HQ) Cl]吸收研究中最有效和可重复的溶解方法.

主要方法:

• 物理溶解 (透,超声波) 与化学溶解 (放射性免疫沉试验 [RIPA] 缓冲器) 的比较.
• 细胞溶解物中蛋白质含量的量测量.
• 使用感应联等离子体质谱法 (ICP-MS) 测量总 ([Ru]) 积累.
• 对塑料表面 ([Ru]) 吸附的评估.

主要成果:

• 放射性免疫沉试验 (RIPA) 缓冲器产生了最高的蛋白质含量和 ([Ru]) 恢复.
• 在RIPA缓冲溶解物中较高的 ([Ru]) 含量可能是由于从塑料板中提取的量增加.
• 在不同方法中观察到整体 ([Ru]) 复合物吸收的最小差异.
• 透法显示较少的干扰,可能保留可变的药物-生物分子添加物.

结论:

• 最佳的细胞解离方法取决于金属药物开发中的具体研究目标.
• 对于不稳定的药物-生物分子添加物,建议采用最不破坏性透法.
• 放射性免疫沉试验 (RIPA) 缓冲器对于量化整体 ([Ru]) 含量是有效的,但可能会影响不稳定物种.
• 对于可重复的金属药物细胞内积累研究,仔细考虑溶解协议是必不可少的.