建立一种新方法,通过光激活细胞分类从平面细胞中分离活跃的X射线敏感细胞

科学领域:

• * 发育生物学 发育生物学
• *再生医学是一种再生医学.
• * 细胞生物学 * 细胞生物学

背景情况:

• *平面再生依赖于新芽细胞的增殖,因此对它们的隔离对研究至关重要.
• *以前使用光激活细胞分类 (FACS) 的方法产生了不可活性的新芽细胞.
• * 怀疑核光染料的细胞毒性会阻碍神经细胞的存活.

研究的目的:

• * 开发一种新的,毒性较低的方法来隔离可活的平面神经母细胞.
• * 为了识别与神经细胞存活和增殖相容的光染料.
• * 为了在体内培养分类的新芽细胞进行再生研究.

主要方法:

• *研究了各种核和细胞质光染料对哺乳动物细胞的毒性.
• * 开发了一种新的隔离协议,使用毒性较低的细胞质染料,calcein AM.
• *使用素AM染色和FACS从Dugesia japonica中分离出来的新芽细胞.
• * 将被移植的分类新芽细胞移植到X射线照射的平面细胞中,以评估生存能力和繁殖.

主要成果:

• *核光染料 (Hoechst 33342,DRAQ5,DyeCycle) 对哺乳动物细胞表现出毒性.
• *细胞质染料calcein AM的毒性较低,可以保持细胞活力.
• *新方法实现了大约89%的neoblast纯度,略低于以前的方法 (大约2倍). 97%).97%).这是一个很好的方法.
• *使用素AM分类的新芽细胞在移植到被辐射的平面动物后成功增殖.

结论:

• * 素AM染色是一种不太有毒的替代方法,用于隔离可活的平面神经母细胞.
• *这种改进的方法有助于研究神经质细胞的行为和平面再生.
• *该技术为隔离和培养干细胞用于再生研究提供了新的可能性.