在Sf9和HEK293细胞中产生的腺相关病毒载体之间,体特性和功效的显著差异
April Giles1, Martin Lock1, Shu-Jen Chen1
1Gene Therapy Program, Department of Medicine, Perelman School of Medicine, University of Pennsylvania, Philadelphia, Pennsylvania, USA.
Human gene therapy
|August 19, 2023
概括
选择一种腺相关病毒 (AAV) 生产系统会影响载体质量. 与HEK293/转染相比,Sf9/baculovirus系统产生的AAV载体质量较低,影响了基因疗法制造.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 基因治疗制造业 基因治疗制造业
- 病毒载体生产病毒载体生产
背景情况:
- 腺相关病毒 (AAV) 载体对于基因疗法至关重要.
- 确保大规模生产高质量的AAV载体对于临床应用至关重要.
- 不同的生产系统可能会影响载体质量属性.
研究的目的:
- 为了比较由Sf9/baculovirus和HEK293/transfection系统产生的AAV载体质量.
- 评估生产系统对体属性和载体强度的影响.
- 为了为临床制造选择最佳的AAV生产平台提供信息.
主要方法:
- 使用Sf9/baculovirus和HEK293/转染系统生产AAV血清型1,8和9.
- 使用两个不同的过程来净化矢量.
- 对囊蛋白组成,翻译后的修改和颗粒含量的分析.
- 评估体外和体外载体功能的评估.
主要成果:
- 在Sf9/baculovirus系统中,AAV蛋白1和2的纳入囊体的减少.
- 在Sf9/baculovirus系统中观察到,囊蛋白脱度增加和空/部分包装颗粒的比例更高.
- 来自Sf9/baculovirus系统的载体表现出显著降低的功效,不论纯化方法.
结论:
- 选择AAV生产系统极大地影响了载体质量和功效.
- 与HEK293 /传染相比,Sf9 / baculovirus系统可能会导致低于最佳的载体属性.
- 对于成功的临床基因疗法制造,需要仔细选择AAV生产平台.
