通过使用CRISPR增强的结构切换阿帕特默试验,高灵敏度和同质检测基于8-oxoguanine的DNA氧化损伤
Hao Hu1, Kejun Dong2, Bei Yan3
1Department of Breast Surgery, Second Hospital of Jilin University, No.4026 Yatai Street, Nanguan District, Changchun, 130041, China; Institute of Reproductive Health, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, 430030, China.
Biosensors & bioelectronics
|August 19, 2023
概括
一个新的CRISPR-Cas12a生物传感器,CESA,提供了对8-oxoguanine (8-oxoG) DNA损伤的敏感检测. 该工具在临床样本中准确量化8-oxoG,有助于疾病诊断.
科学领域:
- 生物分子工程 生物分子工程
- 基因组学就是基因组学.
- 生物传感器技术技术
背景情况:
- 8-oxoguanine (8-oxoG) 是一种影响基因表达的DNA损伤的普遍形式.
- 准确量化8-oxoG对于临床诊断至关重要.
- 现有的检测方法缺乏方便性,成本效益和灵敏性的平衡.
研究的目的:
- 开发一种高度敏感和方便的测定方法,用于检测8-oxoguanine (8-oxoG) 的DNA损伤.
- 加强CRISPR-Cas12a系统,以改善生物传感中的信号噪声比.
- 在各种生物样本中验证新型试验的临床适用性.
主要方法:
- 利用CRISPR-Cas12a系统的缩短crRNA模式来提高信号噪声比.
- 开发了一种使用CRISPR增强的结构切换阿巴胺试验 (CESA) 来检测8-oxoG.
- 在基因组DNA (gDNA) 上使用自由8-oxoG和8-oxoG验证了CESA性能.
主要成果:
- CESA对gDNA上的自由8-oxoG (LOD 32.3 pM) 和8-oxoG (LOD 64.5 pM) 具有高度敏感性.
- CESA成功检测了宫癌患者的血中和乳腺癌组织的gDNA中高水平的8-oxoG水平.
- 在精患者和健康对照者之间,在精液血和精子gDNA中观察到8-oxoG水平的显著差异.
结论:
- 缩短的crRNA模式为CRISPR-Cas12a生物传感器提供了一种新的设计.
- CESA提供了一种灵敏,方便和强大的工具,用于量化8-oxoG DNA 损伤.
- 这种测试对临床诊断和涉及氧化DNA损伤的研究具有重大潜力.
更多相关视频
14:12HPLC Measurement of the DNA Oxidation Biomarker, 8-oxo-7,8-dihydro-2’-deoxyguanosine, in Cultured Cells and Animal Tissues
Published on: August 1, 2015
27.2K
12:15Quantification of three DNA Lesions by Mass Spectrometry and Assessment of Their Levels in Tissues of Mice Exposed to Ambient Fine Particulate Matter
Published on: May 29, 2019
8.8K
