通过CRISPR-Cas12a介导的双酶级联放大,用于敏感的HPV-16标和ATP的色度检测
Shaohua Gong1, Kexin Song1, Shiqi Zhang1
1College of Chemistry, Chemical Engineering and Materials Science, Key Laboratory of Molecular and Nano Probes, Ministry of Education, Collaborative Innovation Center of Functionalized Probes for Chemical Imaging in Universities of Shandong, Institute of Molecular and Nano Science, Shandong Normal University, Jinan, 250014, PR China.
Talanta
|August 20, 2023
概括
这项研究引入了使用CRISPR-Cas12a和双酶放大检测HPV-16DNA和ATP的敏感,无仪器生物传感器. 这种新的平台为医疗诊断提供了快速,可视化的结果.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子诊断学 分子诊断
- 生物感应是一种生物感应.
背景情况:
- 克里斯普尔-卡斯系统为体外诊断提供了强大的工具.
- 开发灵敏的,无仪器检测平台对于 Point-of-Care 应用至关重要.
- 现有的方法往往需要复杂的设备或大量的样品准备.
研究的目的:
- 开发一种使用CRISPR-Cas12a的双酶级联放大策略,用于敏感的,无仪器检测目标分析物.
- 建立一个色度测量平台,用于视觉检测HPV-16的DNA和ATP.
- 为了证明平台对核酸和非核酸目标的多功能性.
主要方法:
- 利用CRISPR-Cas12a进行由目标HPV-16DNA触发的信号传导.
- 集成的葡萄糖氧化酶 (GOx) 和磁纳米粒子 (MNP) 用于酶级联放大.
- 采用磁分离和色度测试以进行视觉检测.
- 通过信号传导过程调整了系统以检测ATP.
主要成果:
- 为HPV-16DNA达到1 pM的低检测极限.
- 证明了ATP的视觉检测极限为2.5μM.
- 在没有专用设备的情况下,在70分钟内完成了整个检测过程.
- 成功地应用了双酶级联策略来检测DNA和ATP.
结论:
- 开发的基于CRISPR-Cas12a的双酶级联放大策略提供了一个强大而敏感的生物传感平台.
- 无仪器的色度测量方法适用于护理点诊断.
- 这种方法为检测各种目标分析物提供了简单可靠的解决方案.
