使用FcRn-Ph-HPLC作为优化的FcRn亲和染色法方法选择具有最佳发育能力的双特异性抗体

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 药理学 药理学是指药理学的学科.

背景情况:

• 在发育早期预测治疗性抗体的药理动力学 (PK) 是至关重要的.
• 新生儿Fc受体 (FcRn) 的结合效率显著影响免疫球蛋白 (IgG) 血清半衰期.
• 现有的FcRn高性能液态染色学 (HPLC) 试验需要根据生理背景和准确的半衰期预测进行修改.

研究的目的:

• 提出一个修改后的FcRn-HPLC测定,称为FcRn-pH-HPLC,用于可重复测量FcRn解离pH.
• 为了将FcRn分离pH与已确定的治疗抗体的in vivo半衰期相关联.
• 评估抗体修饰和双特异格式对FcRn解离pH的影响.

主要方法:

• 开发和应用FcRn-pH-HPLC测定方法.
• 从ROCK®平台测量各种基于IgG的抗体和双特异的FcRn分离pH.
• 测量FcRn分离pH值与已知的in vivo抗体半衰期之间的相关性分析.

主要成果:

• 在FcRn-pH-HPLC方法可重复测量FcRn解离 pH,使相关性与体内半衰期.
• 抗体格式,包括目标和效应抗原结合域的呈现和对双特异的定向,影响FcRn保留.
• Fc 域的修改和稳定二硫化物键对 FcRn 分离 pH 的影响很小.

结论:

• 在生理学上,FcRn-pH-HPLC为解释FcRn结合提供了一种有价值的工具,改善了体内半衰期估计.
• 了解抗体设计如何影响FcRn结合,有助于开发具有量身定制半衰期的治疗性抗体.
• 这种方法可以为设计具有优化开发能力的单,双和多特异性抗体提供信息.