以EV为媒介的肌原分化的促进取决于剂量,收集介质和隔离方法
Britt Hanson1,2, Ioulia Vorobieva1,3, Wenyi Zheng4
1Department of Paediatrics, University of Oxford, South Parks Road, Oxford OX1 3QX, UK.
Molecular therapy. Nucleic acids
|August 21, 2023
概括
细胞外囊泡 (EVs) 调节肌肉细胞分化,但它们的机制不仅仅取决于肌肉特定的微RNA (myomiRs). 在EV制剂中的胰岛素污染可能会混结果,强调需要避免基于聚合物的沉方法.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
- 肌肉生理学 肌肉生理学
背景情况:
- 细胞外囊泡 (EVs) 在细胞通信中发挥作用,并与肌体差异化有关.
- 以前的研究表明,肌肉丰富的microRNAs (myomiRs) 调解了EV对肌肉发育的影响.
- C2C12神经细胞分化受到来自肌肉细胞的EVs的影响.
研究的目的:
- 研究细胞外囊泡 (EVs) 在调节肌体分化中的作用.
- 为了确定肌肉特定的微RNA (myomiRs) 是否是EV驱动肌源性影响的主要媒介.
- 识别和减轻EV隔离和分析中的混因素,用于肌源性差异化研究.
主要方法:
- 利用C2C12小鼠肌细胞和肌管来研究肌原分化.
- 采用超过尺寸排除液体色谱 (UF-SEC) 来分离EV和非EV细胞外蛋白.
- 服用不同剂量的净化EV和蛋白质分片,以评估它们对差异化的影响.
- 在孤立的EV中量化myomiR含量.
主要成果:
- 来自C2C12细胞的EVs以剂量依赖的方式调节了肌源性分化.
- 细胞外蛋白质分量没有影响肌体分化.
- 肌肉丰富的microRNAs (myomiRs) 在EV中发现的数量很低,这表明一个myomiR独立的机制.
- 胰岛素与非EV分数和聚合物沉的EV共同净化被确定为一个混因素.
结论:
- 细胞外囊泡 (EVs) 通过独立于myomiR转移的机制影响肌细胞分化.
- 在EV中存在myomiRs并不是它们亲肌原效应的唯一驱动因素.
- 技术工件,如胰岛素污染和使用聚合物基沉,可以显著影响EV研究的实验结果,应该避免.
