在TLR激活后通过血脑屏障进行T细胞贩运的体外和体外方法

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 神经免疫学 神经免疫学

背景情况:

• 多发性硬化症 (MS) 的发病包括T细胞迁移.
• 了解T细胞贩运对于开发MS疗法至关重要.
• 细胞外基质 (ECM) 相互作用影响免疫细胞迁移.

研究的目的:

• 描述分离和培养人类T细胞和小鼠胞细胞的方法ex vivo.
• 详细介绍用于测量T细胞与ECM蛋白相互作用的体外试验.
• 为了评估T细胞贩运性质.

主要方法:

• 从多发性硬化症患者和健康对照中分离人类T细胞.
• 从实验性自身免疫脑膜炎 (EAE) 小鼠中分离原始胞细胞.
• 原始和激活的T辅助淋巴细胞的磁性分类.
• 在体外细胞培养试验 (标准入侵和手工制作) 来评估ECM相互作用.
• 使用托尔类受体 (TLR) 连接体,T细胞激活剂和细胞粘附分子调节器进行刺激.
• 采集和回收T细胞以评估贩运能力.

主要成果:

• 建立了T细胞和脊髓细胞隔离和培养的协议.
• 证明了在各种刺激下评估T细胞-ECM蛋白相互作用的方法.
• 提供了评估与神经炎症相关的T细胞贩运的技术.

结论:

• 描述的方法使得在神经炎症背景下对T细胞行为的强有力的调查成为可能.
• 这些技术有助于在MS和EAE模型中研究T细胞迁移机制.
• 本章为研究自身免疫性疾病中免疫细胞贩运的研究人员提供了宝贵的资源.