基于重组酶聚合酶放大和CRISPR/Cas12a的Trogoderma granarium everts的新型和快速视觉检测试验

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 昆虫学 昆虫学是一门学科.
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 哈普拉甲虫 (Trogoderma granarium Everts) 是一个主要的全球隔离害虫,在储存的谷物中造成重大经济损失.
• 越来越多的拦截率凸显出需要有效的识别方法,特别是将其与相似物种区分开来.
• 目前的识别方法可能耗时,阻碍了港口和仓库的早期检测和控制工作.

研究的目的:

• 开发一种快速而准确的视觉检测测定量,用于khapra甲虫.
• 为了使边境港口和仓库能够在T. granarium的早期监测和拦截.
• 为了区分T. granarium和与之密切相关的Dermestidae物种.

主要方法:

• 设计和选择特定的复合酶聚合酶放大 (RPA) 起始剂和CRISPR/Cas12acrRNA用于T. granarium.
• 基于CRISPR/Cas12a的可视化系统的优化,用于快速检测.
• 将RPA放大与CRISPR/Cas12a检测集成在一起,以在37°C时40分钟内进行视觉读取.

主要成果:

• 该试验成功地使用简单的热源和蓝光从九种类似的dermestidae物种中区分了khapra甲虫.
• 该方法表现出高灵敏度,能够检测到低DNA水平 (10−1 ng μL−1) 甚至可以检测到单个khapra甲虫蛋.
• 测试完成,包括DNA提取 (5分钟简单方法) 和反应,大约需要40分钟.

结论:

• 开发的可视化系统提供了一种快速,具体和敏感的方法,用于在室温 (37°C) 下检测khapra甲虫.
• 这种测量适合在仓储害虫管理中实施,有助于防止广泛传播的害虫.
• 该研究为监测和识别其他害虫物种提供了有价值的参考资料.