诱导后人类诱导的多能干细胞培养和表征的协议
Yu-Shan Cheng1, Miao Xu1, Guibin Chen1
1National Center for Advancing Translational Sciences, National Institutes of Health, Bethesda, Maryland.
Current protocols
|August 23, 2023
概括
这项研究提供了培养和表征人类诱导多能干细胞 (hiPSCs) 的详细方案. 这些方法确保高质量的hiPSC用于疾病建模和再生医学应用.
科学领域:
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 再生医学是一种再生医学.
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 人类诱导的多能干细胞 (hiPSCs) 具有自我更新和分化能力.
- hiPSCs对于疾病建模,药物开发,细胞疗法和再生医学具有价值.
- 维持高质量的hiPSCs需要特殊的技术,与标准细胞系培养不同.
研究的目的:
- 为hiPSC传播提供全面,逐步的协议.
- 详细介绍hiPSC表征和质量控制的方法.
- 作为与hiPSCs工作的实验室工作人员的参考指南.
主要方法:
- 化学定义,无料培养条件用于hiPSC的繁殖.
- 免疫细胞化学和流动细胞计分析用于多能性标志物的验证.
- 在体内测试瘤形成试验,以评估多能性.
- RT-PCR用于确认仙台病毒载体清除.
主要成果:
- 建立了成功hiPSC扩张和传播的协议.
- 评估hiPSC多能性和质量的详细方法.
- 在培养后确保消除病毒载体.
结论:
- 提供的协议使得高质量hiPSC的持续生成成为可能.
- 这些方法对于研究和治疗中可靠的下游应用至关重要.
- 本指南支持实验室工作人员掌握hiPSC培养技术.
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