全同步的皮秒脉冲和时隔检测提高了脑组织成像中的两光 STED 显微镜的空间分辨率
Hirokazu Ishii1,2,3, Kohei Otomo1,2,4, Ching-Pu Chang1,2,5
1Exploratory Research Center on Life and Living Systems (ExCELLS), National Institutes of Natural Sciences, Okazaki, Japan.
PloS one
|August 24, 2023
概括
我们开发了一种新的全脉冲双光子激发 (2PE) STED显微镜,具有时间隔离. 这种技术通过排除不必要的信号,显著提高了深部脑部成像的空间分辨率.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 显微镜的使用方法
- 生物物理学的生物物理.
背景情况:
- 超分辨率显微镜使得深层大脑结构的纳米尺度可视化成为可能.
- 双光子刺激 (2PE) 显微镜对于体内脑部成像至关重要.
- 刺激发射耗尽 (STED) 显微镜提高了分辨率,但在分散组织方面面临挑战.
研究的目的:
- 开发一种新的2PE STED显微镜,结合时间隔离,以改善深度脑部成像.
- 评估时间隔离对大脑组织空间分辨率的影响.
- 为了使神经元结构和动态的更深层次的超高分辨率观测.
主要方法:
- 为2PE-STED开发一个完全同步的皮秒脉冲光源.
- 时间隔离的光检测的整合.
- 使用开发的全脉冲2PE-gSTED显微镜对脑组织进行成像.
主要成果:
- 新的全脉冲2PE-gSTED显微镜在脑组织中实现了超高分辨率的成像.
- 时间隔离显著提高了空间分辨率,与非隔离成像相比大约1.4倍.
- 通过使用时间间隔,有效排除来自大脑组织的不良信号.
结论:
- 时隔是提高2PE STED脑组织显微镜中的空间分辨率的关键和高度有效的方法.
- 开发的全脉冲2PE-gSTED显微镜可以更深入,更详细地观察神经元结构的超分辨率.
- 这种先进的显微镜技术将促进大脑内细胞内动态的研究.


