通过多重滴滴数字PCR在双转的CAR T细胞中检测和量化集成载体拷贝数
Wei Wang1, Muhammad Al-Hajj1, Alireza S Alavi1
1Autolus Therapeutics, The MediaWorks, 191 Wood Lane, W12 7FP London, UK.
Molecular therapy. Methods & clinical development
|August 25, 2023
概括
多重滴滴数字PCR (ddPCR) 准确地量化了工程CAR T细胞中的多个目标. 这种方法对于评估神经母细胞瘤治疗中仿真抗原受体 (CAR) T 细胞疗法至关重要.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 免疫治疗是一种免疫疗法.
背景情况:
- 化学抗原受体 (CAR) T细胞疗法在血液恶性瘤中取得了成功.
- 目前正在对CAR T细胞在神经母细胞瘤等固体瘤中的疗效进行研究.
- AUTO6NG是一种双转换的GD2向CAR,旨在增强T细胞活性.
研究的目的:
- 开发和验证多重ddPCR试验,以量化AUTO6NG CAR T细胞中的矢量拷贝数 (VCN).
- 评估多重 ddPCR 试验的准确性,灵敏性和可重复性.
- 为了能够精确量化综合载体,以评估CAR T细胞治疗的疗效.
主要方法:
- 开发使用双通道系统的多重ddPCR测定.
- 同时检测和量化来自AUTO6NG CAR T细胞的基因组DNA中的三个目标.
- 验证测试的特异性,敏感性,准确性和可重复性.
主要成果:
- 开发的多重ddPCR试验证明了高特异性,灵敏度,准确性和可重复性.
- 在标准双重和多重ddPCR试验之间的VCN测量中没有发现显著差异.
- 该试验有效地使多个目标的同时检测和量化成为可能.
结论:
- 多重复合ddPCR是一种准确且具有成本效益的方法,用于在工程CAR T细胞中同时量化目标.
- 这种验证的测定对于评估新型CAR T细胞疗法的性能至关重要,例如AUTO6NG.
- 这些发现支持使用ddPCR进行CAR T细胞产品的强有力的质量控制和临床监测.
