生成表达阿卡班病毒N蛋白的稳定细胞系,并深入了解其在病毒复制中的功能
Jingjing Wang1, Dongjie Chen1, Fang Wei1
1Institute of Animal Inspection and Quarantine, Chinese Academy of Inspection and Quarantine, Beijing 100176, China.
Pathogens (Basel, Switzerland)
|August 25, 2023
概括
研究人员开发了表达阿卡班病毒 (AKAV) 核体 (N) 蛋白的稳定细胞系,以改善AKAV检测. 这些细胞系还揭示了对AKAV N蛋白质的洞察力.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 阿卡班病毒 (AKAV) 是一种导致牲畜先天性形的树冠病毒.
- AKAV核体 (N) 蛋白对于病毒复制至关重要,也是检测的目标.
研究的目的:
- 建立稳定的细胞系,构成性地表达AKAV N蛋白质.
- 研究AKAV N蛋白表达对病毒复制的影响.
主要方法:
- 病毒系统和胺素选择产生表达AKAV N蛋白的BHK-21细胞系 (C8H2,F7E5).
- 通过RT-PCR,间接免疫光 (IFA) 和西部涂抹 (Western Blot) 来确认基因整合,转录和蛋白质表达.
- 在工程细胞系中的AKAV生长动力学分析.
主要成果:
- 稳定的BHK-21细胞系 (C8H2,F7E5) 构成性地表达了AKAV N蛋白,并成功地产生了.
- 这些细胞系特别与AKAV N蛋白单克隆抗体 (mAbs) 反应.
- 在C8H2和F7E5细胞中,与下调病毒mRNA (Gc和RdRp) 相关的AKAV复制被暂时抑制.
结论:
- 已建立的细胞系作为AKAV检测的有价值的工具.
- AKAV N 蛋白质表达影响病毒复制,为其功能提供了新的见解.
