腺相关病毒的化学表观遗传调节输送的转基因
Jessica D Umaña1, Sara R Wasserman1, Liujiang Song2,3
1Division of Chemical Biology and Medicinal Chemistry,Center for Integrative Chemical Biology and Drug Discovery, UNC Eshelman School of Pharmacy, University of North Carolina at Chapel Hill, Chapel Hill, North Carolina, USA.
Human gene therapy
|August 25, 2023
概括
这项研究引入了一种用于腺相关病毒 (AAV) 基因表达的新化学控制方法. 化学表观遗传修饰剂 (CEM) 增强了转基因表达,为更安全,更有效的AAV疗法提供了时间控制.
科学领域:
- 基因治疗 基因治疗
- 分子生物学分子生物学
- 表观遗传学 在表观遗传学中,表观遗传学是指表观遗传学.
背景情况:
- 基因相关病毒 (AAV) 是一种具有广泛组织热带性的多功能基因疗法载体.
- 目前的局限性包括缺乏转基因表达控制和由于高病毒剂量的潜在免疫问题.
- 低的转基因表达可能会阻碍治疗疗效,需要改进的控制机制.
研究的目的:
- 为了验证一种新的*in vitro*可化学控制的腺相关病毒 (AAV) 转基因表达技术.
- 评估化学表观遗传修饰剂 (CEM) 在增强AAV转基因表达方面的有效性.
- 为了证明AAV转基因表达的时间和可逆控制.
主要方法:
- 开发了编码记者转基因和合成指 (ZF) 蛋白-FKBP融合的重组AAV (rAAV) 载体.
- 利用化学表观遗传修饰剂 (CEM) 向ZF蛋白质,并通过内源表观遗传机制增强转基因表达.
- 在CEM治疗后,HEK293T和其他细胞系中评估了转基因表达水平 (露西法酶,GFP).
主要成果:
- 在剂量取决的方式中,CEM87显著增强了AAV转基因表达,达到5倍.
- 在CEM87治疗后24小时观察到转基因产品的峰值活性.
- 在不同的转基因和细胞系中观察到CEM87介导的增强,独立于AAV体血清型.
- 在药物清除或FK506竞争时,CEM87的效应是可逆的.
结论:
- 使用CEMs验证了一种可化学控制的rAAV转基因表达系统.
- 证明了对AAV转基因表达的时间和可逆控制 *in vitro*.
- 这项技术有可能提高基于AAV的基因疗法和研究的安全性和效率.
