敲除CLTC基因可以减少但不能完全阻止SFTSV感染
Tiezhu Liu1, Jiajia Li2, Xueqi Wang3
1National Health Commission Key Laboratory for Medical Virology, National Institute for Viral Disease Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing, China.
PloS one
|August 25, 2023
概括
即使没有克拉重链 (CLTC),SFTSV仍然可以感染细胞. 脂质介导的内分细胞溶解作为SFTSV进入的克拉素独立途径,与克拉素依赖的机制一起.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 克拉特林对于病毒进入宿主细胞至关重要.
- 之前的研究部分抑制了克拉特林功能,使得完全缺乏克拉特林在SFTSV感染中的作用不清楚.
研究的目的:
- 在没有克拉的情况下,研究SFTSV进入机制.
- 建立一个克拉斯林重链 (CLTC) 淘汰细胞系,用于研究克拉斯林功能.
- 为了确定SFTSV.的替代病毒进入途径.
主要方法:
- 使用CRISPR/Cas9技术创建了一个CLTC淘汰A549细胞系.
- 通过PCR,西斑,免疫光和T7E1分析验证了CLTC淘汰赛.
- 使用PCR和桑格测序来评估非目标效应.
- 用CLTC和没有CLTC进行了SFTSV感染测定,使用脂质和巨细胞酶抑制剂.
主要成果:
- 在CLTC淘汰细胞中,SFTSV感染显著减少,但未被消除.
- 脂质抑制剂 菲律宾,但不是巨细胞酶抑制剂 EIPA,减少了SFTSV感染.
- 菲律宾的抑制作用在CLTC淘汰细胞中更为明显.
- 这表明,克拉素依赖性内细胞和脂质介导的内细胞分裂都是SFTSV的主要入口途径.
结论:
- 一个CLTC淘汰细胞系被成功生成,为克拉特林功能研究提供了一个新型模型.
- SFTSV可以独立于克拉特林感染细胞,利用脂质介导的内细胞分解作为关键的替代途径.
