为分子检测技术优化病毒无活化方法:对病毒蛋白和RNA测量的影响
Takema Hasegawa1, Sachie Shibayama1, Yukiko Osumi1
1Bio-medical standard group, Research Institute for Material and Chemical Measurement, National Metrology Institute of Japan (NMIJ), National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (AIST), Tsukuba, Ibaraki, Japan.
Journal of virological methods
|August 25, 2023
概括
热无活化是准备无活化病毒用于分子检测的最有效方法. 这种方法对病毒蛋白和RNA的影响最小,在ELISA和RT-dPCR等测试中确保可靠的定量性能.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 有效的病毒检测需要可靠的阳性对照材料进行测试验证.
- 无活化的病毒是合适的对照物,但无活化方法可以改变目标分子.
- 目前对优化分子检测控制器的无活化进行的研究很少.
研究的目的:
- 为了研究和比较各种病毒不活化方法.
- 评估无活化对病毒蛋白和RNA的影响.
- 为了确定分子检测的最佳失活条件.
主要方法:
- 评估了紫外线 (UV) 辐射,热量,β-propiolactone (BPL),过氧化 (H2O2) 和酸 (HClO4) 对于病毒的无活化.
- 使用酶链免疫吸收试验 (ELISA) 和逆转录数字聚合酶链反应 (RT-dPCR) 对病毒蛋白和RNA的评估影响.
主要成果:
- 紫外线和热处理对ELISA的干扰最小.
- 热处理对病毒RNA的RT-dPCR测量影响最小.
- 无活化方法显著影响病毒组件完整性不同.
结论:
- 热无活化是一种有前途的方法,用于生产用于分子检测的无活化病毒.
- 这种方法保留了病毒蛋白和RNA完整性,用于定量测试.
- 优化的热无活化可以为病毒诊断提供有效的阳性控制.
