在大肠杆菌Escherichia coli中,重新组合的人类类原I的温度控制表达

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 分子生物学分子生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 原蛋白是一种重要的结构蛋白,在医学,组织工程,食品和化品中具有多种应用.
• 对于这些行业来说,开发功能原片段的高效和可扩展的生产方法至关重要.

研究的目的:

• 在大肠杆菌 (E. coli) 中设计和表达人类I型原蛋白 (rhLCOL-I) 的功能片段. (大肠杆菌). 这就是大肠杆菌.
• 为了优化表达条件,并评估复合原片的产量,可溶性和稳定性.
• 评估rhLCOL-I在促进皮肤细胞功能方面的生物活性.

主要方法:

• 设计了一种人类I型原蛋白 (rhLCOL-I) 的功能片段.
• 在大肠杆菌 (E. coli) 中表达的rhLCOL-I. coli) BL21(DE3) PlysS使用热诱导等离子体 (pBV-rhLCOL-I).
• 优化表达温度和扩大发酵到7升.
• 进行功能性测试以评估细胞迁移和粘附在体外和体内.

主要成果:

• 在可溶性形式下,在42°C时达到总蛋白质的36.3%的最佳rhLCOL-I表达.
• 从7L发酵中获得1.88g/L的纯化rhLCOL-I的产量.
• 在发酵过程中表现出极好的等离子体稳定性,即使没有抗生素.
• 证实了rhLCOL-I促进皮肤细胞迁移和粘附的能力.

结论:

• 开发了一种高水平,低成本的方法,用于在E.中生产功能性原片段. 大肠杆菌.
• 再组合的人类I型原片段 (rhLCOL-I) 显示出医学应用的潜力.
• 这种方法为生物医学用途提供了可扩展和高效的原蛋白来源.