结合计算机辅助预测器来提高纳托金酶的热稳定性
Yuan Li1, Liangqi Chen2, Xiyu Tang2
1Institute of Materia Medica, Xinjiang University, Urumqi 830017, China.
Foods (Basel, Switzerland)
|August 26, 2023
概括
研究人员增强了纳托基纳酶.
科学领域:
- 酶学 是一种酶学.
- 生物技术是生物技术.
- 蛋白质工程是指蛋白质的工程.
背景情况:
- 纳托基纳酶是一种来自食物的酶,表现出强烈的血栓溶解活性.
- 它在医药和食品工业中的应用受到低温稳定性阻碍.
- 提高纳托金酶的热稳定性对于工业生产至关重要.
研究的目的:
- 为了增强来自*Bacillus mojavensis* LY-06 (AprY) 的纳托金酶的热稳定性和纤维分解活性.
- 为了确定特定的突变,以提高工业应用的酶性能.
主要方法:
- 利用热稳定性预测算法指导蛋白质工程.
- 产生的单点变体 (S33T,T174V,N218L) 和多点变体.
- 评估了工程变体的热稳定性 (t1/2) 和纤维溶解活性.
- 进行生物信息学和结构分析以了解稳定机制.
主要成果:
- 变种S33T和T174V显著增加了热稳定性 (8.87倍和2.51倍) 和活性 (1.17倍和1.28倍).
- 双重突变S33T-T174V结合改善了热稳定性和活性,稳定性增加了21.3%,活性增加了24.8%.
- 结构分析表明,活跃和关键环区域的刚性增加有助于增强热稳定性.
结论:
- 开发了有效的策略,通过向突变增强纳托金酶的热稳定性.
- 该S33T-T174V变种显示出工业生产和应用的潜力,因为其提高了热稳定性和纤维溶解活性.
- 了解热稳定性的结构决定因素为进一步的酶工程提供了基础.
