使用密度梯度分离和大小排除染色法分离肝脏和脂肪组织衍生的细胞外囊
Juan Alfonso Martínez-Greene1, Margarita Gómez-Chavarín2, María Del Pilar Ramos-Godínez3
1Laboratory of Cell Communication and Extracellular Vesicles, National Institute of Genomic Medicine (INMEGEN), Mexico City 14610, Mexico.
International journal of molecular sciences
|August 26, 2023
概括
研究人员开发了一种新方法,可以直接从小鼠肝脏和脂肪组织中分离细胞外囊泡 (EV). 这项技术提高了EV的纯度,以更好地了解它们的疾病作用.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 细胞外囊泡 (EVs) 在疾病诊断和治疗中至关重要.
- 目前从细胞培养物或体液中分离的方法缺乏体内微环境复杂性和囊泡异质性.
- 需要从组织样本中直接隔离EV.
研究的目的:
- 建立一个协议,直接从肝脏和脂肪组织中分离EVs.
- 验证孤立电动汽车的纯度和特性.
- 为了能够在体内更深入地研究EV分子组成和功能.
主要方法:
- 从小鼠肝脏和脂肪组织中分离EVs,使用超离心和二醇-糖密度梯度分离.
- 证实了EV隔离通过西方斑点的EV标记物,总蛋白质量化,和传输电子显微镜.
- 尺寸排除色谱 (SEC) 的应用,以提高肝脏组织的EV纯度.
主要成果:
- 从肝脏和脂肪组织中成功分离了EVs.
- 通过已建立的蛋白质标记物,蛋白质定量和显微镜验证了EV隔离.
- 此外,SEC从肝脏组织中进一步净化了EVs,表明了高等级的隔离.
结论:
- 开发的协议可以从组织样本中直接分离高纯度的EV.
- 这种方法有助于更准确地研究EV分子形状和细胞间通信 in vivo.
- 它为了解EVs在疾病发病和治疗策略中的作用开辟了新的途径.
