调转录因子DegU用于培养Bacillus pumilus中的细胞外蛋白酶过度生产者
Chao-Ying Xie1, Wen-Jin Li1, Hong Feng2
1Key Laboratory for Bio-resources and Eco-Environment of the Ministry of Education, Sichuan Key Laboratory of Molecular Biology and Biotechnology, College of Life Sciences, Sichuan University, Chengdu, 610064, People's Republic of China.
Microbial cell factories
|August 27, 2023
概括
全球转录机械工程 (gTME) 在Bacillus pumilus中增强了性蛋白酶 (AprE) 生产. 通过对DegU转录因子进行工程,AprE的产量增加了2.7倍,证明了一种新的菌株工程策略.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 全球转录机械工程 (gTME) 是通过改变基因表达来优化微生物生产的关键策略.
- 菌是一种重要的工业微生物,但其生产能力往往需要提高.
研究的目的:
- 改造 Bacillus pumilus 中的正转录因子 DegU,以增强性蛋白酶 (AprE) 生产.
- 通过转录基因和分子动态分析,调查AprE产量增加背后的机制.
主要方法:
- 利用gTME在AprE基因网络中修改DegU调节器.
- 删除负转录因子 (SinR,Hpr,AbrB) 来促进AprE合成.
- 在B. pumilus菌株中使用CRISPR/Cas9选择了超活跃的DegU突变体,并使用CRISPR/Cas9集成了一个特定的突变体 (degU(L113F)).
主要成果:
- 工程B. pumilus菌株在LB介质中产生性蛋白酶 (AprE) 的数量是对照菌株的2.7倍.
- 鉴定了degU ((L113F) 作为增强AprE生产的关键突变.
- 转录组和分子动态分析提供了对高收益机制的见解.
结论:
- 调整像DegU这样的全球监管机构是改善B. pumilus生产绩效的可行且至关重要的方法.
- 这项研究为挑战性微生物系统的基因功能研究和菌株工程提供了一个成功的模型.
更多相关视频
09:14Modifying Baculovirus Expression Vectors to Produce Secreted Plant Proteins in Insect Cells
Published on: August 20, 2018
11.6K
08:34Generation of In-Frame Gene Deletion Mutants in Pseudomonas aeruginosa and Testing for Virulence Attenuation in a Simple Mouse Model of Infection
Published on: January 8, 2020
6.8K
